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TOV-112D 人上皮性卵巢癌細(xì)胞

TOV-112D 人上皮性卵巢癌細(xì)胞

產(chǎn)品型號:

所屬分類:細(xì)胞系

產(chǎn)品時(shí)間:2024-05-13

簡要描述:TOV-112D 人上皮性卵巢癌細(xì)胞
我公司以客戶為核心,以產(chǎn)品質(zhì)量求生存,以售后服務(wù)求信譽(yù)。我們通過不斷改進(jìn)來提高效率,絕不以犧牲品質(zhì)作為代價(jià)。“誠信、創(chuàng)新、嚴(yán)謹(jǐn)、專業(yè)"愿以飽滿的熱情期待各界朋友攜手合作,共創(chuàng)輝煌!

詳細(xì)說明:


TOV-112D 人上皮性卵巢癌細(xì)胞

蘇州千舍生物實(shí)驗(yàn)室所出售細(xì)胞,均含有STR鑒定報(bào)告,保證細(xì)胞最佳狀態(tài)發(fā)貨~~

規(guī)格: 1*10 6   

該細(xì)胞系于 1992 年 10 月從一名42歲女性患有早發(fā)性卵巢癌的患者中啟動(dòng)。該患者為法裔加拿大血統(tǒng),卵巢癌家族史不明。與 TOV-21G ( ATCC CRL-11730 ) 和 OV-90 ( ATCC CRL-11732 ) 不同,TOV-112D 細(xì)胞系在染色體 3p24 處沒有缺失。

 

細(xì)胞特性

 

1) 來源:42歲 女性 卵巢癌組織

 

2) 形態(tài):上皮樣   貼壁生長

 

3) 含量:>1x10^6  細(xì)胞數(shù)

 

4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

 

5)用途:僅供科研使用。

 

運(yùn)輸和保存

 

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

 

(1)1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

 

(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

 

細(xì)胞接收后的處理

 

1)收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

 

2)請?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

 

3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的wan全培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上,可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中,若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。

 

4)備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的wan全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。  收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。                      

 

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

 

1) 準(zhǔn)備基礎(chǔ)培養(yǎng)基是 1:1 的 MCDB 105 培養(yǎng)基(含最終濃度為 1.5 g/L 碳酸qing鈉)和M199 培養(yǎng)基(含最終濃度為 2.2 g/L 碳酸qing鈉)的混合物,優(yōu)質(zhì)胎牛血清,15%;雙抗,1%。

 

備注:該細(xì)胞生長緩慢,培養(yǎng)周期在3-4周左右。

 

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

 

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

 

二. 細(xì)胞處理:

 

1) 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:

 

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mLwan全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,wan全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8mlwan全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

 

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

 

對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法:

 

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

 

2. 加入0.25%(w / v)胰dan白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時(shí)間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

 

3. 輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的wan全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

 

3)細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

 

下面T25瓶為例;

 

1. 細(xì)胞凍存時(shí)按照細(xì)胞傳代的過程收集消化好的細(xì)胞到離心管中,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),來決定細(xì)胞的凍存密度。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×10^6~1×107個(gè)活細(xì)胞/ml.

 

2. 1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞 ,按每1ml凍存液含1×10^6~1×107個(gè)活細(xì)胞/ml分配到一個(gè)凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中,標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。

 

3. 將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲(chǔ)存。同時(shí)記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

 

細(xì)胞培養(yǎng)的原則

 

無菌原則

 

1.操作臺(tái)環(huán)境無菌:紫外線消毒至少30分鐘,75%酒精擦拭。

 

2.實(shí)驗(yàn)材料無菌:紫外線照射、酒精擦拭、酒精燈、封口膜。

 

3.實(shí)驗(yàn)時(shí)手部無菌。

 

4.實(shí)驗(yàn)操作無菌。

 

減少細(xì)胞環(huán)境擾動(dòng)原則

 

1.培養(yǎng)箱內(nèi)溫度恒定,進(jìn)行操作前培養(yǎng)基預(yù)熱。

 

2.轉(zhuǎn)移細(xì)胞時(shí)需輕拿輕放、避免震動(dòng)。

 

3.縮短細(xì)胞在培養(yǎng)箱外的時(shí)間,維持恒定的CO2濃度。

 

4. 槍頭吹打時(shí)要輕柔,避免細(xì)胞發(fā)生破壞。

TOV-112D 人上皮性卵巢癌細(xì)胞

小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 neuro-2a+luc

小鼠胰腺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 panc02+LUC

小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞+GFP RAW 264.7+GFP

小鼠前列腺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 RM-1+LUC

大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞綠色熒光標(biāo)記 C6+LUC

大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞低分化+GFP PC12低分化+GFP

中國倉鼠卵巢細(xì)胞k1 亞克隆系 CHO-K1(懸?。?/span>

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